针刺肩痛穴治疗肩周炎技术培训推广效果评价

目的 分析针刺肩痛穴治疗肩周炎技术的培训和推广效果,探讨制约该技术培训推广的主要因素.方法 选派医务人员进行集中培训,由其返回到医疗机构进行技术推广.随访调查获得相关信息,并进行统计学检验,分析培训和推广效果.结果 经集中培训后,培训对象的平均成绩提高了49.04分,知晓率提高了42.61%.该技术需求程度和掌握程度均为100%.技术的使用率、有效率分别为40.74%,93.45%.结论 针刺肩痛穴治疗肩周炎技术培训及推广效果良好,适宜在农村大面积推广.     

用RP-HPLC法测定爽口灵含漱液中替硝唑的含量

目的建立用反向高效液相色谱法测定爽口灵含漱液中替硝唑含量的方法.方法色谱条件：以甲醇-水-冰醋酸（20：80：0.1）为流动相,康科德C18柱,紫外检测波长310nm;流动相流速为1ml/min.结果得回归方程为A=54 320.0C＋20 325.2（r=0.9999）,线性范围10～50μg/ml,平均回收率98.60%,重复进样RSD=0.60%（n=5）.结论本法用于测定爽口灵含漱液中替硝唑的含量,结果准确、可靠,能满足质量控制的要求.     

维生素E琥珀酸酯诱导K562/ADM细胞凋亡过程中线粒体结构和功能的改变

目的：观察维生素E琥珀酸酯（vitamin E succinate，VES）诱导K562／ADM耐药细胞凋亡过程中线粒体形态及功能的改变。方法：采用annexin V／PI双标记法和透射电镜检测K562／ADM细胞凋亡；电镜观察凋亡细胞线粒体形态结构变化；流式细胞仪（FCM）检测线粒体跨膜电位（△ψm）和caspase-3活性变化；激光共聚焦显微镜分析细胞色素C（cytochrome c，Cyt c）的释放。结果：20μmol／L和40μmol／L VES处理K562／ADM细胞12～24h，annexin V／PI染色检测发现早期凋亡细胞明显增加，并呈现典型的凋亡形态改变。线粒体内外膜融合、缩小、碎片化，嵴减少且紊乱；线粒体△ψm降低，细胞质内Cytc释放增多；caspase-3活性显著增强。结论：VES可能通过改变线粒体的形态结构和稳定性，导致线粒体膜电位降低，Cytc释放，caspase-3激活而诱发K562／ADM耐药细胞凋亡。     

三氧化二砷经内质网应激反应诱导K562/ADM耐药细胞凋亡

目的　探讨三氧化二砷（As2O3）能否通过内质网应激反应性凋亡途径诱发耐药白血病细胞凋亡。方法　采用细胞形态学和AnnexinV/PI 双染色法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞内质网和线粒体形态结构变化;流式细胞术（FCM）测定线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞内Ca2+和细胞色素c（Cyt c）含量及caspase-3活性;Western blot法检测GRP78/Bip蛋白表达。结果　2、5 mol/L As2O3诱导K562/ADM细胞发生凋亡过程中,内质网明显扩张和脱颗粒,线粒体内外膜融合,嵴紊乱,肿胀,内膜扩张呈空泡样变。线粒体Δψm降低,细胞质Ca2+和Cyt c水平明显升高, caspase-3活性显著增强,GRP78蛋白表达增高。结论　As2O3可诱导K562/ADM细胞发生内质网应激反应,通过内质网-线粒体途径诱导耐药白血病K562/ADM细胞凋亡。     

胰岛素抵抗的人肝癌细胞HepG2对多柔比星的敏感性

目的:观察胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)的人肝癌细胞对抗癌药物多柔比星(adriamycin,ADM)的敏感性,并探讨其抗药机制.方法:采用5×10-6 moL/L胰岛素诱导(36和48 h)人肝癌细胞HepG2建立HepG2/IR细胞模型,并用盐酸吡格列酮(pioglitazone hydrochloride, PH)逆转HepG2/IR细胞的IR状态.MTT法检测HepG2/IR细胞对ADM的敏感性,FCM检测P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)的表达水平,实时荧光定量RT-PCR检测多药耐药基因1(multiple drug resistance 1, MDR1)mRNA的表达.结果:HepG2/IR细胞对ADM的敏感性降低(P<0.05),MDR1 mRNA的表达量分别是HepG2细胞的1.62倍(胰岛素诱导36 h)和5.21倍(胰岛素诱导48 h),P-gp蛋白的阳性表达率分别提高了47.50%(胰岛素诱导36 h)和189.05%(胰岛素诱导48 h).PH可逆转HepG2/IR细胞MDR1/P-gp的表达增加以及逆转细胞对ADM的抗药性.结论:胰岛素诱导的人肝癌细胞HepG2/IR可通过增加MDR1/P-gp的表达,使细胞对抗癌药物产生抗药性.     

鬼臼毒素纳米脂质体对人白血病细胞的凋亡诱导作用

目的研究鬼臼毒素纳米脂质体对人白血病细胞K562的凋亡诱导效应。方法薄膜超声分散法制备鬼臼毒素纳米脂质体。不同浓度的鬼臼毒素和鬼臼毒素纳米脂质体分别处理K562细胞,MTT法检测细胞的增殖活性,细胞形态学改变和AnnexinⅤ/PI染色检测细胞凋亡。结果鬼臼毒素纳米脂质体对K562细胞增殖的抑制作用明显高于鬼臼毒素,24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.71、0.02、0.003μg·ml-1,而鬼臼毒素为1.50、0.12、0.05μg·ml-1;0.01μg·ml-1鬼臼毒素纳米脂质体处理24、72h,AnnexinⅤ/PI染色K562细胞凋亡率分别为91.1%和92.7%,但72h时以晚期凋亡为主;而0.01μg·ml-1鬼臼毒素处理的细胞凋亡率分别为63.4%和66.8%。鬼臼毒素纳米脂质体和鬼臼毒素处理后,K562细胞出现皱缩、胞膜起泡、凋亡小体等典型的细胞凋亡形态学改变。结论鬼臼毒素纳米脂质体较鬼臼毒素对白血病K562细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效应。     

三氧化二砷诱导K562/ADM耐药细胞凋亡中活性氧的作用

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）诱导K562／ADM细胞凋亡中活性氧（ROS）的作用和其与耐药基因radr1及其编码的P-糖蛋白（P—gP）表达的关系。方法：应用噻唑蓝（MTT）比色法检测K562／ADM细胞增殖活性；Annexin V／PI染色法检测细胞凋亡；RT-P（鼠检测mdr1基因mRNA的表达；流式细胞术测定P-gP表达、ROS活性和细胞内阿霉素（ADM）含量。结果：As2O3显著抑制K562／ADM细胞的增殖，Annexin V／PI双染检测显示凋亡细胞明显增加：ROS活性明显下降；mdr1 mRNA和P-gP表达明显降低，P-gP功能受抑，细胞内ADM含量显著增高。结论：As2O3抑制K562／ADM耐药细胞的增殖活性和促进其凋亡，其机制可能为通过降低细胞ROS水平、抑制radr1/P-gp的表达和功能，进而逆转mdr1/P-gP介导的多药耐药和凋亡抑制。     

成人脂肪间充质干细胞冻存的实验研究

目的 探寻成人脂肪间充质干细胞冻存和复苏的条件,观察冻存前后脂肪间充质干细胞的形态学特征以及向心肌细胞诱导分化的潜能.方法 自成人脂肪组织分离培养脂肪间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子.将脂肪间充质干细胞于液氮中低温冻存,经3个月后复苏,倒置相差显微镜及透射电子显微镜下观察细胞形态.5-氮杂胞苷进行诱导,免疫荧光技术检测心肌特异性肌钙蛋白-Ⅰ.比较冻存前后脂肪间充质干细胞的形态学特征及诱导转化率.结果 脂肪间充质干细胞较幼稚,冻存前后光镜下的形态及电镜下的超微结构无明显差别,脂肪间充质干细胞呈CD29阳性表达,HLA-DR阴性表达.冻存前后脂肪间充质干细胞经5-氮杂胞苷诱导后第28天均可表达心肌特异性肌钙蛋白-Ⅰ,诱导转化率无差异.结论 脂肪间充质干细胞可耐受低温冻存,复苏后细胞的形态学特征以及诱导分化潜能无明显变化.     

炎症性肠病动物模型的研究进展

克罗恩病和溃疡性结肠炎统称为炎症性肠病（IBD），病因虽不明确，但对其发病机理已有了较多的了解。该病的发生是由于个体易感性、肠道菌群和粘膜免疫相互作用所致。炎症性肠病动物模型可通过化学性诱导、免疫学、遗传学等方法获得。三硝基苯磺酸与乙醇灌肠致炎法是目前最常用的方法，本文侧重概述介绍三硝基苯磺酸诱导的炎症性肠病的机制、模型、应用及优缺点，为疾病的研究、治疗和新药的开发提供指导。     

siRNA抑制K562/ADM细胞mdr1基因表达并逆转其耐药性

背景与目的：白血病耐药性是白血病治疗中的难点，RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点，可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子（siRNA）对白血病多药耐药K562／ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法：设计、筛选和合成针对mdr1基因的siRNAs（si—mdrl—1，si—mdr1—2），脂质体介导转染K562／ADM细胞；RT—PCR法检测mdr1 mRNA的转录；流式细胞术测定P-糖蛋白（P—gP）表达水平；MTT法检测K562／ADM细胞对多柔比星（阿霉素，ADM）的敏感性。结果：si—mdr1—1、si-mdr1-2转染24h和48h，si—mdr1—1的抑制率分别为55．5％和22．5％，而si—mdr1—2则分别为16．0％和57．6％。si—mdr1—1和si—mdr1—2作用72h时，P—gP的表达强度分别下降74％和85％。si—mdr1—1和si—mdr1—2均可提高K562／ADM细胞对多柔比星的敏感性、逆转其耐药性，逆转倍数分别为2．52倍和1．96倍。结论：siRNA可特异性地沉默mdr1基因的表达，逆转P—gP介导的白血病细胞耐药性。